【歐洲議會(huì)和理事會(huì)指令】實(shí)驗(yàn)程序造成動(dòng)物傷害嚴(yán)重程度的分類
2023.02.09歐洲議會(huì)和理事會(huì)指令2010/63/EU
附錄8 實(shí)驗(yàn)程序造成動(dòng)物傷害嚴(yán)重程度的分類
實(shí)驗(yàn)程序造成動(dòng)物傷害的嚴(yán)重程度應(yīng)由單個(gè)動(dòng)物在操作過(guò)程中預(yù)期會(huì)經(jīng)歷的疼痛（pain）、痛苦(suffering)、焦慮（distress）或持久傷害的程度來(lái)確定。
第一部分 嚴(yán)重性分類
1.不可恢復(fù)（Non-recovery）:
在全身麻醉下進(jìn)行的且動(dòng)物不會(huì)再恢復(fù)意識(shí)的手術(shù)應(yīng)被歸類為“不可恢復(fù)”類。
2.輕度（Mild）:
對(duì)動(dòng)物進(jìn)行的手術(shù)可能使動(dòng)物經(jīng)歷短期的輕微疼痛、痛苦或焦慮，同時(shí)對(duì)動(dòng)物的健康或一般狀況沒有重大損害的手術(shù)應(yīng)被歸為“輕度”。
3.中度（Moderate）:
對(duì)動(dòng)物進(jìn)行的手術(shù)可能使動(dòng)物經(jīng)歷短期的中度疼痛、痛苦或焦慮，或長(zhǎng)期的輕度疼痛、痛苦或焦慮，對(duì)動(dòng)物的健康或一般狀況造成中度損害的手術(shù)應(yīng)被歸為“中度”。
4.嚴(yán)重(Severe):
對(duì)動(dòng)物進(jìn)行的手術(shù)可能使動(dòng)物經(jīng)歷劇烈的疼痛、痛苦或焦慮，或長(zhǎng)期的中度疼痛、痛苦或焦慮，對(duì)動(dòng)物的健康或一般狀況造成嚴(yán)重?fù)p害的手術(shù)應(yīng)被歸為“嚴(yán)重”。
第二部分 分類標(biāo)準(zhǔn)
傷害嚴(yán)重程度分類應(yīng)考慮到規(guī)定程序內(nèi)對(duì)動(dòng)物實(shí)施的所有干預(yù)或操作。它應(yīng)基于在應(yīng)用改良技術(shù)后，動(dòng)物個(gè)體可能經(jīng)歷的最嚴(yán)重的影響。
在將實(shí)驗(yàn)程序分類時(shí)，應(yīng)全面考慮程序的類型及其他因素。以下因素應(yīng)逐個(gè)考慮：
-抓取和操作的類型；
-程序(包括所有要素)將造成動(dòng)物的疼痛、痛苦、焦慮或持久傷害的性質(zhì)，及其強(qiáng)度、持續(xù)時(shí)間、操作的頻率和多重性（multiplicity）；
-同一程序中動(dòng)物遭受痛苦的累積；
-阻止動(dòng)物自然行為的表達(dá)，包括居住條件（housing）、飼養(yǎng)(husbandry)和護(hù)理標(biāo)準(zhǔn)(care standards)的限制。
第三部分依據(jù)與實(shí)驗(yàn)程序相關(guān)的因素給出了每種實(shí)驗(yàn)程序應(yīng)屬于哪一類的例子。它們?yōu)槟硞€(gè)特定程序應(yīng)屬于傷害嚴(yán)重程度分類中的哪一類提出了最初的提示。
但最終對(duì)實(shí)驗(yàn)程序造成動(dòng)物傷害的嚴(yán)重程度分類，還應(yīng)考慮下列因素:
-動(dòng)物種類和基因型;
-動(dòng)物的成熟度、年齡及性別;
-動(dòng)物針對(duì)特定程序的訓(xùn)練經(jīng)驗(yàn);
-如果動(dòng)物被重復(fù)使用，需考慮先前實(shí)驗(yàn)程序造成傷害的嚴(yán)重程度;
-減少或消除疼痛、痛苦和焦慮的方法，包括改善居住條件、飼養(yǎng)和護(hù)理?xiàng)l件;
-人道終點(diǎn)。
第三部分
根據(jù)與實(shí)驗(yàn)程序類型相關(guān)的因素，將不同類型的程序分類（舉例）。
1. 輕度:
(a)排除以安樂死為目的麻醉，而實(shí)施的其他麻醉;
(b)藥代動(dòng)力學(xué)研究，單次給藥并僅采集有限血量的血液樣本(采血總量<動(dòng)物總循環(huán)血量的10%)，且預(yù)計(jì)該物質(zhì)不會(huì)引起任何可檢測(cè)到的不良反應(yīng);
(c)在恰當(dāng)?shù)逆?zhèn)靜或麻醉下，對(duì)動(dòng)物進(jìn)行非侵入性成像(如核磁共振成像);
(d)淺表手術(shù)，如耳和尾部活檢、微型泵和應(yīng)答器的非手術(shù)皮下植入;
(e)使用只對(duì)動(dòng)物造成輕微損傷或?qū)?dòng)物正?；顒?dòng)和行為造成輕微干擾的外部遙測(cè)裝置;
(f)通過(guò)皮下、肌肉注射、腹腔注射、灌胃和經(jīng)淺表血管靜脈注射給藥，且該物質(zhì)對(duì)動(dòng)物的影響輕微，針對(duì)動(dòng)物種類和大小（size）給藥劑量在適當(dāng)范圍內(nèi);
(g)誘發(fā)腫瘤，或不會(huì)引起可檢測(cè)到的臨床不良反應(yīng)的自發(fā)腫瘤(如小的、皮下的、非侵入性結(jié)節(jié));
(h)培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，預(yù)計(jì)該表型僅對(duì)動(dòng)物福利產(chǎn)生輕微影響;
(i)飼喂非常規(guī)（修改過(guò)配方）飼料，不能滿足動(dòng)物的所有營(yíng)養(yǎng)需求，預(yù)計(jì)在研究期間會(huì)引起輕微的臨床異常;
(j)短期內(nèi)(< 24h)，在代謝籠內(nèi)限制活動(dòng);
(k)涉及短期內(nèi)剝奪同伴、單獨(dú)飼養(yǎng)成年大鼠或小鼠的研究;
（l)將動(dòng)物暴露在會(huì)造成短暫輕度疼痛、痛苦或焦慮的有害刺激下，同時(shí)動(dòng)物有能力成功避免該刺激的研究模型;
(m)下列情況的組合或累積可被歸類為“輕度”:
(i)通過(guò)非侵入性方法和最小限度限制活動(dòng)的方法，評(píng)估或測(cè)量動(dòng)物身體成分;
(ii)通過(guò)非侵入性技術(shù)監(jiān)測(cè)心電圖（ECG），對(duì)于習(xí)慣該操作的動(dòng)物只需很小程度的或基本不會(huì)限制其活動(dòng)。
(iii)應(yīng)用外部遙測(cè)設(shè)備，預(yù)計(jì)不會(huì)對(duì)適應(yīng)社會(huì)性生活的動(dòng)物造成損害，也不會(huì)干擾其正?；顒?dòng)和行為;
(iv)飼養(yǎng)預(yù)期無(wú)臨床上可檢測(cè)到的不良表型的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物;
(v)在飼料中添加惰性標(biāo)記物以跟蹤食糜通過(guò)的路徑;
(vi)成年大鼠禁食< 24小時(shí);
(vii)礦場(chǎng)試驗(yàn)。
2. 中度:
(a)經(jīng)常使用產(chǎn)生中度臨床反應(yīng)的試驗(yàn)物質(zhì)，在幾天內(nèi)采集有意識(shí)動(dòng)物的血液樣本(采血總量>動(dòng)物總循環(huán)血量的10%)而不會(huì)補(bǔ)充血容量;
(b)以非致命終點(diǎn)為實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)的急性劑量范圍研究、慢性毒性/致癌性試驗(yàn);
(c)在全身麻醉和恰當(dāng)鎮(zhèn)痛下進(jìn)行的手術(shù)，并與手術(shù)后疼痛、痛苦或一般狀況的損傷有關(guān)。包括開胸、開顱、開腹、睪丸切除術(shù)、淋巴結(jié)切除術(shù)、甲狀腺切除術(shù)、能有效固定并處理傷口的骨科手術(shù)、能有效處理排斥反應(yīng)的器官移植手術(shù)、手術(shù)植入導(dǎo)管或生物醫(yī)學(xué)設(shè)備(如遙測(cè)發(fā)射裝置、微型泵等);
(d)預(yù)計(jì)會(huì)引起中度疼痛或痛苦或?qū)?dòng)物正常行為有中度干擾的腫瘤或自發(fā)腫瘤誘導(dǎo)模型;
(e)亞致死劑量照射或化療，或以致死劑量照射或化療，但動(dòng)物可重建免疫系統(tǒng)。不良反應(yīng)預(yù)計(jì)為輕度或中度，且是短暫的(< 5天);
(f)培育對(duì)動(dòng)物福利產(chǎn)生中等影響的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物;
(g)通過(guò)外科手術(shù)制備轉(zhuǎn)基因動(dòng)物;
(h)使用代謝籠，在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)(最多5天)適度限制活動(dòng);
(i)在研究期間，非常規(guī)（修改過(guò)配方）飼喂，不能滿足動(dòng)物所有的營(yíng)養(yǎng)需求，并預(yù)計(jì)會(huì)導(dǎo)致中度臨床異常;
(j)成年大鼠禁食48小時(shí);
(k)在動(dòng)物無(wú)法逃脫或避免刺激時(shí)，引起動(dòng)物逃避和回避反應(yīng)，并預(yù)計(jì)會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物中度痛苦。
3.嚴(yán)重:
(a)毒性試驗(yàn)，以死亡為終點(diǎn)，或預(yù)計(jì)會(huì)發(fā)生死亡，并誘發(fā)嚴(yán)重的病理生理改變。如單次劑量急性毒性試驗(yàn)(見經(jīng)合組織OECD試驗(yàn)指南);
(b)測(cè)試可能導(dǎo)致動(dòng)物劇烈疼痛、焦慮或死亡的裝置(如心臟輔助裝置);
(c)疫苗效力測(cè)試，動(dòng)物狀況持續(xù)受損，進(jìn)行性疾病直至死亡，伴有持久的中度疼痛、焦慮或痛苦;
(d)以致死劑量照射或化療且動(dòng)物不能不重建免疫系統(tǒng)，或重建產(chǎn)生移植物抗宿主病;
(e)誘發(fā)腫瘤或自發(fā)腫瘤的模型，預(yù)計(jì)會(huì)導(dǎo)致與長(zhǎng)期中度疼痛、痛苦或焦慮相關(guān)的進(jìn)行性致命性疾病。如導(dǎo)致惡病質(zhì)的腫瘤、侵襲性骨腫瘤、導(dǎo)致轉(zhuǎn)移擴(kuò)散的腫瘤以及可能發(fā)生潰瘍的腫瘤;
(f)對(duì)處于全身麻醉狀態(tài)的動(dòng)物進(jìn)行的手術(shù)和其他干預(yù)，預(yù)計(jì)會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重或持續(xù)的術(shù)后中度疼痛、痛苦或焦慮，或?qū)?dòng)物的一般狀況造成嚴(yán)重和持續(xù)的損害。如不能有效固定的骨折、不能充分鎮(zhèn)痛的開胸手術(shù)或外傷造成的多器官功能衰竭;
(g)器官排斥反應(yīng)可能導(dǎo)致器官移植動(dòng)物嚴(yán)重的痛苦或一般狀況受損(如異種移植);
(h)飼養(yǎng)患有遺傳疾病的動(dòng)物，這些動(dòng)物預(yù)計(jì)會(huì)經(jīng)歷嚴(yán)重和持續(xù)的損傷，如亨廷頓氏病、肌肉萎縮癥、慢性復(fù)發(fā)性神經(jīng)炎模型;
(i)使用代謝籠，長(zhǎng)時(shí)間、嚴(yán)重限制活動(dòng);
(j)不可避免的電擊(如為了讓動(dòng)物產(chǎn)生習(xí)得性無(wú)助);
(k)長(zhǎng)期完全隔離飼養(yǎng)社會(huì)性動(dòng)物，如狗和非人類靈長(zhǎng)類動(dòng)物;
(l)給予固定的應(yīng)激刺激以誘導(dǎo)大鼠胃潰瘍或心力衰竭;
(m)以疲勞為終點(diǎn)的強(qiáng)迫游泳或運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)。
